【摘要】 潔凈室（Clean Room）是醫學(xué)院校教學(xué)和科研必備的實(shí)驗條件之一， 正確使用潔凈室是保證實(shí)驗數據準確性的前提， 針對高校老師及研究生在使用潔凈室過(guò)程中存在的不足， 本文從概念、要求、監測方法、注意事項等幾個(gè)方面全面闡述了如何正確使用潔凈室。 

　在醫學(xué)院校不管是教學(xué)還是科研工作潔凈室是必備的實(shí)驗條件之一。其中實(shí)驗教師以及研究生更是使用潔凈室的主力軍， 但在教學(xué)過(guò)程中發(fā)現， 很多教師和研究生對如何正確使用潔凈室還存在很多誤區， 本文將從潔凈室的概念、要求、監測方法、使用注意點(diǎn)幾個(gè)方面綜合闡述如何正確使用潔凈室。 

　　1 什么是潔凈室 
　　首先高校師生對潔凈室的概念存在誤區， 大部分師生都稱(chēng)之為無(wú)菌室， 事實(shí)上絕對無(wú)菌的空間是很難獲得的， 更專(zhuān)業(yè)的稱(chēng)呼如題名應該叫 “潔凈室”[1]。那什么樣的空間可以稱(chēng)之為“潔凈室”呢？以下從概念、狀態(tài)、氣流形式、分級幾個(gè)方面來(lái)闡述。同時(shí)引申一個(gè)問(wèn)題， 潔凈到什么樣的程度才可以符合實(shí)驗要求？ 
　　概念：對塵粒及微生物污染規定需進(jìn)行環(huán)境控制的房間和區域， 其建筑結構、裝備及其使用均具有減少對該區域污染的介入、產(chǎn)生和滯留的功能[2]。其他相關(guān)參數如溫度、濕度、壓力也有必要控制。 
　　狀態(tài)：靜態(tài) （at-rest）指凈化空氣調節系統已安裝完畢且功能完備的情況下， 潔凈室內工作人員撤離現場(chǎng)并經(jīng)過(guò)20 min自?xún)艉蟮臓顟B(tài)。動(dòng)態(tài)（operational）指潔凈室處于正常工作狀態(tài)， 設備正常運行， 并且有指定的人員按照規范操作。對于高校師生來(lái)講更應該關(guān)注動(dòng)態(tài)的監測結果。 
　　氣流形式：?jiǎn)蜗蛄鳎╱nidirectional airflow）：沿單一方向呈平行流線(xiàn)并且與氣流方向垂直的斷面上風(fēng)速均勻的氣流。與水平面垂直的叫垂直單向流（vertical unidirectional airflow）， 與水平面平行的叫水平單向流（horizontal unidirectional airflow）。非單向流（non-unidirectional airflow）：具有多個(gè)通路循環(huán)特性或氣流方向不平行的氣流。高校實(shí)驗用潔凈室由于面積比較小， 一般都是垂直單向流設計的。 
　　2 潔凈室的要求 
　　潔凈室等級：潔凈度 （cleanliness）是指潔凈環(huán)境內單位體積空氣中含大于或等于某一粒徑懸浮粒子的統計數量來(lái)區分的潔凈程度[3]。根據《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規范》（2010）規定， 分級見(jiàn)表1。 
　　醫學(xué)院校的潔凈室大都進(jìn)行生物實(shí)驗， 所以還應當關(guān)注環(huán)境的微生物狀況。要求見(jiàn)表2。 
　　根據《中國藥典》（2010）規定， 無(wú)菌檢查應在環(huán)境潔凈度 10000 級， 局部潔凈度 100 級的單向流空氣區域內或隔離系統中進(jìn)行， 對于醫學(xué)院校的生物實(shí)驗， 如無(wú)特殊規定也都按這個(gè)要求， 也就是通常所見(jiàn)10000級實(shí)驗室套100級超凈臺的設計[4]。以下著(zhù)重闡述高校使用率最高的10000級實(shí)驗室套100級超凈臺的潔凈室的監測和使用。判定10000級潔凈室及100級超凈工作臺是否有效運行應該分別按照表1、表2的C級和A級執行。 
　　3 潔凈室的監測 
　　潔凈室需要控管的項目包括溫度、濕度、靜壓差、風(fēng)速、微粒、浮游菌、沉降菌， 當然在設計之初還有噪音、光照度、安全、節能等方面的考慮。對于使用者來(lái)說(shuō)使用過(guò)程中學(xué)會(huì )日常監測非常重要， 這是保證教學(xué)科研工作的前提之一， 也有利于在出現異常數據時(shí)排查原因。 
　　溫度、濕度、靜壓差、風(fēng)速是預測試指標， 只有這些指標都在規定范圍內， 后續3個(gè)主測試指標的監測才有意義。溫濕度要求使用者可以自己把握， 如無(wú)特殊要求時(shí)， 溫度在18～26℃， 相對濕度在45%～65%為宜。潔凈室與非潔凈室之間的靜壓差應>10 Pa；相鄰不同潔凈級別的潔凈室之間的壓差應>0.5 Pa；潔凈區與室外壓差應>12 Pa。單向流凈室實(shí)測室內平均風(fēng)速應大于設計風(fēng)速， 但不應超過(guò)15%。以上測試可以通過(guò)溫濕度儀、微壓計、風(fēng)速儀來(lái)完成。 
　　懸浮粒子測試可以通過(guò)微粒計數儀來(lái)完成。監測時(shí)首先用面積開(kāi)根號的方法確定最少采樣點(diǎn)數目， 學(xué)校生物實(shí)驗室都比較小， 一般每間3～4個(gè)點(diǎn)就夠了， 采樣時(shí)需注意采樣點(diǎn)在室內均勻分布并盡量避開(kāi)回風(fēng)口， 采樣管口應正對氣流方向， 高度約離地80 cm， 測試人員應在采樣口的下風(fēng)側， 并盡量減少活動(dòng)。為保證儀器下次能正常使用， 采樣完畢一定啟動(dòng)儀器的自?xún)舫绦颉?nbsp;
　　浮游菌、沉降菌的采樣方法及注意事項同懸浮粒子， 分別通過(guò)浮游菌采樣儀及帶有微生物培養基的平皿來(lái)完成。培養皿在用于檢測時(shí)， 為避免培養皿運輸或搬運過(guò)程造成的影響， 宜同時(shí)進(jìn)行陰性對照試驗， 每次或每個(gè)區域取1個(gè)對照皿， 與采樣皿同法操作但不需暴露采樣， 然后與采樣后的培養皿一起放入培養箱內培養， 結果應無(wú)菌落生長(cháng)。 
　　至于以上指標的監測頻率除沉降菌外使用者可以自己把握， 潔凈室啟用之初應每周監測， 如果數據穩定， 適當延長(cháng)周期， 但建議至少每3個(gè)月監測1次。每次實(shí)驗時(shí)超凈臺及潔凈室內都應當放置沉降菌平板， 相當于一個(gè)實(shí)驗環(huán)境的陰性對照， 而對于微生物實(shí)驗， 尤其是細菌總數， 只有在監測數據符合對應等級的潔凈室要求時(shí)數據才有效。 
　　4 使用潔凈室的注意事項 
　　嚴格控制進(jìn)出潔凈室的人員， 最好門(mén)徑管理， 只有有實(shí)驗需求的師生方可進(jìn)入， 謝絕一切不必要的參觀(guān)。進(jìn)出實(shí)驗室嚴格按照設計路徑。 
　　使用潔凈室之前先打開(kāi)凈化空氣調節系統和紫外燈， 至少運行30 min；實(shí)驗相關(guān)物品經(jīng)傳遞窗紫外燈照射30 min后進(jìn)入實(shí)驗室， 物品準備齊全， 避免實(shí)驗過(guò)程中反復進(jìn)出實(shí)驗室增加污染幾率；進(jìn)入潔凈室必須換鞋、更衣、帶好口罩帽子， 帽子必須將頭發(fā)全部遮住， 然后風(fēng)淋進(jìn)入緩沖區， 最后進(jìn)入實(shí)驗室。值得一提的是， 使用者如果患有呼吸道疾病或皮膚疾病盡量不要進(jìn)入潔凈室， 以免影響實(shí)驗結果。 
　　實(shí)驗過(guò)程中嚴格無(wú)菌操作， 避免喧嘩、吵鬧， 更不能飲水， 吃東西， 與實(shí)驗不相關(guān)的東西不得帶入實(shí)驗室。 
　　實(shí)驗結束徹底清潔消毒， 紫外燈消毒30 mim。師生們需要注意的是紫外燈使用是有壽命的， 做好紫外燈使用記錄， 如果有紫外燈強度計日常監測那就更好了。 
　　5 討論 
　　不管是科研還是教學(xué)， 實(shí)驗數據的真實(shí)性一直是我們不懈追求的目標。在潔凈室完成的生物實(shí)驗一旦污染自然前功盡棄， 對于微生物實(shí)驗來(lái)說(shuō)， 還可能造成嚴重的結果偏離， 影響教學(xué)科研質(zhì)量， 更讓很多老師及在校研究生的辛勤勞動(dòng)付之東流。 
　　工作中發(fā)現高校師生使用潔凈室時(shí)主要存在的不足是：使用不規范， 維護不重視， 日常不監測。雖然大部分師生在實(shí)驗中很注意無(wú)菌操作， 但由于忽視了實(shí)驗操作所在的大環(huán)境， 實(shí)驗污染的情況還是時(shí)有發(fā)生。所以醫學(xué)院校的師生還是很有必要進(jìn)行潔凈室概念、要求、監測方法、使用注意事項的宣傳， 建議建立使用潔凈室的標準作業(yè)指導書(shū)， 潔凈室專(zhuān)人管理， 配備溫濕度儀、微壓計、風(fēng)速儀、微粒計數儀、浮游菌采樣儀、紫外燈強度計、微生物培養箱等必要的監測儀器， 數據有問(wèn)題時(shí)及時(shí)報修， 必要時(shí)暫停使用， 保證師生在一個(gè)安全有效的實(shí)驗環(huán)境下開(kāi)展教學(xué)科研工作。