保持手術(shù)間“相對密閉狀態(tài)”，保證空氣的潔凈度：應保持層流手術(shù)室物品相對固定，盡量減少工作人員進(jìn)出次數。手術(shù)室凈化采用空氣潔凈技術(shù)對微生物污染采取程度不同的控制，達到控制空間環(huán)境中空氣潔凈度適于各類(lèi)手術(shù)之要求；并提供適宜的溫、濕度，創(chuàng )造一個(gè)潔凈舒適的手術(shù)空間環(huán)境。由于手術(shù)室要嚴格控制低細菌數及低麻醉氣體濃度，所以層流超凈裝置的穩定性是層流凈化手術(shù)室的重要驗收指標。層流手術(shù)室不同級別的層流系統，其控制空間環(huán)境中的空氣置換率也不同，潔凈度級別越高，置換率越快，反之亦然。層流手術(shù)室墻壁應用具有抑菌作用的特殊涂料粉刷，光線(xiàn)明亮，色彩柔和且不須用水清潔沖洗。手術(shù)室凈化由于歐美手術(shù)室潔凈標準與中國環(huán)境存在細微差別，常規的國際標準和國內區域行業(yè)標準都普遍難于確保手術(shù)室凈化的長(cháng)期穩定（一般只能3-10年重建、低檔工程1年即需要翻新），所以在工程質(zhì)量方面出現了明顯的檔次劃分。一些知名凈化工程公司，在通行標準之外，基本都設有自身執行的高于國際化通行標準的凈化指標。
常規用的手術(shù)耗材、液體、藥品等均在層流手術(shù)室的玻璃墻柜中分類(lèi)放齊、放全，位置（position )相對固定，保持基數；把與手術(shù)相關(guān)的各種儀器（appliance）如電刀、顯微鏡、腹腔鏡等固定在手術(shù)間，各類(lèi)物品分類(lèi)、分規格(specifications)擺放，標識清楚，使物各有位、過(guò)目知數、一目了然。 每天專(zhuān)人負責巡查及添置室內物品并登記；手術(shù)人員及參觀(guān)者(visitor)進(jìn)入手術(shù)室后，盡量減少走動(dòng)，各項動(dòng)作要輕柔，勿在手術(shù)室抖動(dòng)各種敷料。手術(shù)過(guò)程中保持前后門(mén)關(guān)閉，以避免頻繁（frequency)開(kāi)關(guān)時(shí)空氣流動(dòng)污染；盡量避免一位巡回護士同時(shí)巡回多臺手術(shù)，保證手術(shù)間處于相對封閉狀態(tài)。
強化清潔管理，減少各種污染的機會(huì )：層流手術(shù)室的一切清潔工作必須采用濕拭打掃，在凈化空調系統運行中進(jìn)行。每天早晨濕拭并用消毒液"擦拭(cleanse) "手術(shù)室的物品，濕拭拖地并用消毒液擦洗墻面。層流手術(shù)室地面保持整潔，術(shù)中如有血液、體液濺到儀器（appliance）或地面，及時(shí)用浸濕消毒液的抹布擦拭；手術(shù)間設有尖銳物收集箱、感染類(lèi)垃圾收集袋及非感染性垃圾收集袋，術(shù)中產(chǎn)生的垃圾分類(lèi)放置，術(shù)后集中處理，每臺手術(shù)結束后器械護士將污染敷料置于污物車(chē)內，由工人從污物通道運出，減少對地面的污染，減少污物在室間停留時(shí)間；每次手術(shù)完畢用消毒液擦拭手術(shù)間的無(wú)影燈、器械臺、手術(shù)床、床墊和體位墊及其他物品表面，并用消毒液濕拭清潔地面。
每周進(jìn)行徹底（thorough)的清潔工作，不同級別的層流手術(shù)室使用各自專(zhuān)用的拖把以防止交叉感染，并用500 mg/L的含氯消毒劑浸泡消毒。每星期清洗初效過(guò)濾網(wǎng)(Filter mesh)1次，出風(fēng)口1次，并用消毒液"擦拭(cleanse) "回風(fēng)口過(guò)濾網(wǎng)。中效、高效過(guò)濾網(wǎng)每2年更換1次。 塑膠(相關(guān)聯(lián)事物:塑料)地板定期請清潔公司用專(zhuān)業(yè)單圓機清洗加打蠟(candle)(wax)。每月對潔凈手術(shù)室內空氣潔凈度和物體表面進(jìn)行特殊結構:莢膜、鞭毛、菌毛（fungus)監測（Food Monitor)。加強出入口的管理：在層流手術(shù)室大門(mén)及無(wú)菌（fungus)(意思:沒(méi)有活菌（fungus))區入口處鋪設易清洗且可用消毒液浸泡的地墊，每日更換，這將對進(jìn)出的推車(chē)及其車(chē)輪起到除塵和消毒作用。設立交換廳，嚴格區分室內車(chē)、室外車(chē)，病人由病人通道入室，進(jìn)出必須更換交換車(chē)。每日增加交換區清潔地面的次數。